In vivo Gonadoprotective Effects of Myricetin on Cisplatin- Induced Testicular Damage via Suppression of TLR4/NF-kB Inflammation Pathway and Heat-Shock Response / Efectos Gonadoprotectores in vivo de la Miricetina sobre el Daño Testicular Inducido por Cisplatino Mediante la Supresión de la Vía de Inflamación TLR4/NF-kB y la Respuesta al Choque Térmico

SUMMARY: The aim of this study is to reveal the gonadoprotective effects of myricetin (MYC), which has many biological properties, on cisplatin (CP)-induced testicular damage in rats. For this purpose, 40 male Wistar albino rats were divided into 4 groups as Control (group given no treatment), MYC (group given 5 mg/kg/i.p myricetin for 7 days), CP (group given 7 mg/kg/i.p cisplatin at 7th day) and MYC + CP (group given 5 mg/kg/i.p myricetin for 7 days before 7 mg/kg/i.p cisplatin injection). After administrations, testicular tissues of animals were extracted and processed according to tissue processing protocol. Hematoxylin & Eosin staining were performed to evaluate the histopathological changes and Johnsen'sTesticular Biopsy Score (JTBS) was applied and mean seminiferous tubule diameters (MSTD) were measured to compare experimental groups in terms of histopathological changes. Moreover, TLR4, NF-kB, HSP70 and HSP90 expression levels were detected by immunohistochemical staining and the density of immunoreactivity were measured to determine the difference in the expression levels of these factors among groups. Additionally, testicular apoptosis was detected via TUNEL assay. JTBS and MSTD data were significantly lower in CP group compared to other groups and MYC administrations significantly protects testicular tissue against CP-induced damage. Moreover, TLR4, NF-kB, HSP70 and HSP90 expressions and apoptotic cells significantly increased in the CP group (p<0.05). However, MYC administrations exerted a strong gonadoprotective effect on testicular tissue in terms of these parameters in MYC+CP group (p<0.05). According to our results, we suggested that MYC can be considered as a protective agent against cisplatin-induced testicular damage.

El objetivo de este estudio es revelar los efectos gonadoprotectores de la miricetina (MYC), que tiene muchas propiedades biológicas, sobre el daño testicular inducido por cisplatino (CP) en ratas. Para este propósito, se dividieron 40 ratas albinas Wistar macho en 4 grupos: Control (grupo que no recibió tratamiento), MYC (grupo que recibió 5 mg/kg/i.p de miricetina durante 7 días), CP (grupo que recibió 7 mg/kg/i.p de cisplatino al séptimo día) y MYC + CP (grupo que recibió 5 mg/ kg/i.p de miricetina durante 7 días antes de la inyección de 7 mg/ kg/i.p de cisplatino). Después de las administraciones, se extrajeron y procesaron tejidos testiculares de animales según el protocolo de procesamiento de tejidos. Se realizó tinción con hematoxilina y eosina para evaluar los cambios histopatológicos y se aplicó la puntuación de biopsia testicular de Johnsen (JTBS) y se midieron los diámetros medios de los túbulos seminíferos (MSTD) para comparar los grupos experimentales en términos de cambios histopatológicos. Además, los niveles de expresión de TLR4, NF-kB, HSP70 y HSP90 se detectaron mediante tinción inmunohistoquímica y se midió la densidad de inmunorreactividad para determinar la diferencia en los niveles de expresión de estos factores entre los grupos. Además, se detectó apoptosis testicular mediante el ensayo TUNEL. Los datos de JTBS y MSTD fueron significativamente más bajos en el grupo CP en comparación con otros grupos y las administraciones de MYC protegen significativamente el tejido testicular contra el daño inducido por CP. Además, las expresiones de TLR4, NF-kB, HSP70 y HSP90 y las células apoptóticas aumentaron significativamente en el grupo CP (p<0,05). Sin embargo, las administraciones de MYC ejercieron un fuerte efecto gonadoprotector sobre el tejido testicular en términos de estos parámetros en el grupo MYC+CP (p<0,05). Según nuestros resultados, sugerimos que MYC puede considerarse como un agente protector contra el daño testicular inducido por cisplatino.

Efecto de la Vitamina E en Células Peritubulares de Testículos de Ratones Mus musculus Tratados con Ácido Valproico Durante el Estado Fetal y Pubertad / Effect of Vitamin E on Peritubular Cells from Testis of Mus musculus Mice Treated with Valproic Acid During the Fetal Stage and Puberty

El ácido valproico (VPA) es un fármaco antiepiléptico teratógenico que, al ser administrado durante etapas tempranas del embarazo, puede producir alteraciones en el desarrollo embriofetal, las que se manifiestan tanto a nivel del sistema nervioso como del testículo. No obstante, se ha reportado que la administración de vitamina E (VE) podría revertir dichas alteraciones. El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto protector de la VE a nivel testicular en fetos y ratones púberes expuestos a VPA durante la fase embrionaria de su desarrollo. Se utilizó un total de 30 ratones hembra adultas gestantes (Mus musculus) cepa BALB/c, las cuales se dividieron en 6 grupos. El estudio contempló el análisis de fetos machos a los 17,5 días post-coital (dpc) y machos juveniles a las 6 semanas post-natal. A los grupos 1 y 4 se les administró 0,3 mL de solución fisiológica (grupos control para 17,5 dpc y 6 semanas postnatal, respectivamente). A los grupos 2 y 5 se les suministró la cantidad de 600 mg/kg de VPA (grupos VPA), en tanto que a los grupos 3 y 6 se les aplicó la misma dosis de VPA complementada con 200 UI de VE (grupos VPA+VE). Se describió la histología normal y patológica del compartimento peritubular del testículo. En los grupos VPA se evidenció una degeneración de la pared peritubular, y atrofia de túbulos seminíferos, así como exfoliación de las células germinales. Por el contrario, en los grupos VPA+VE tales signos no fueron observados y la morfología presentó aspecto normal solo con algunas alteraciones focales. Estos resultados corroboran el hecho que la administración de VE contrarresta en parte, los efectos deletéreos que ocasiona el VPA.

SUMMARY: Valproic acid (VPA) is a teratogenic antiepileptic drug that, when administered during the early stages of pregnancy, can produce alterations in embryo-fetal development, which manifest both at the level of the nervous system and the testicle. However, it has been reported that the administration of vitamin E (VE) could reverse these alterations. The study aimed to determine the protective effect of VE at the testicular level in fetuses and pubertal mice exposed to VPA during the embryonic phase of their development. 30 pregnant adult female mice (Mus musculus) BALB/c strain were used, which were divided into 6 groups. The study included the analysis of male fetuses at 17.5 days post-coital (dpc) and juvenile males at 6 weeks post-natal. Groups 1 and 4 were administered 0.3 mL of physiological solution. Groups 2 and 5 were given 600 mg/kg of VPA (VPA groups), while groups 3 and 6 were given the same dose of VPA supplemented with 200 IU of VE (VPA+VE). The normal and pathological histology of the peritubular compartment of the testis was described. In the VPA groups, degeneration of the peritubular wall, and atrophy of the seminiferous tubules, as well as exfoliation of the germ cells, were evident. On the contrary, in the VPA+VE groups such signs were not observed and the morphology presented a normal appearance with only some focal alterations. These results corroborate the fact that the administration of VE partially counteracts the deleterious effects caused by VPA.

The Effects of White Tea (Camellia Sinensis) and Infliximab Against Cisplatin- Induced Testicular Damage via Oxidative Stress and Apoptosis / Efectos del Té Blanco (Camellia Sinensis) e Infliximab Contra el Daño Testicular Inducido por Cisplatino a Través del Estrés Oxidativo y la Apoptosis

SUMMARY: Cisplatin (Cis) is an important chemotherapeutic agent used in cancer treatment. Males exposed to Cis were reported to exhibit testicular toxicity. Cis-induced testicular toxicity is mediated by oxidative stress, inflammation, testosterone inhibition and apoptosis. Accordingly, this study was conducted to evaluate the potential protective roles of infliximab (IFX), which is an anti- TNF-a agent, and of white tea (Camellia sinensis), which is known to possess antioxidant, anti-apoptotic, and anti-inflammatory effects, against Cis-induced testicular toxicity in rats. Rats were randomly assigned into five groups as follows: control group, Cisplatin (7 mg/kg) treatment group, Cisplatin (7 mg/kg) + infliximab (7 mg/kg) treatment group, cisplatin + white tea (WT) treatment group, and Cisplatin+ WT+IFX combined treatment group. In the present study, Cis exposure reduced the sperm count. It also increased testicular oxidative stress as well as the levels of inflammatory and apoptotic markers. Histopathological assays supported the biochemical findings. Treatment with IFX and/or WT restored testicular histology, preserved spermatogenesis, suppressed oxidative stress and apoptosis, and significantly ameliorated Cis-induced damage. It was concluded that white tea and infliximab could potentially serve as therapeutic options for the protection of testicular tissue against the harmful effects of Cis.

El cisplatino (Cis) es un importante agente quimioterapéutico utilizado en el tratamiento del cáncer. Se informó que los hombres expuestos a Cis exhibieron toxicidad testicular. La toxicidad testicular inducida por Cis está mediada por el estrés oxidativo, la inflamación, la inhibición de la testosterona y la apoptosis. En consecuencia, este estudio se realizó para evaluar las posibles funciones protectoras de infliximab (IFX), un agente anti-TNF-α, y del té blanco (Camellia sinensis), conocido por sus propiedades antioxidantes, antiapoptóticas y anti-TNF-α -efectos inflamatorios, contra la toxicidad testicular inducida por Cis en ratas. Cinco grupos de ratas se asignaron al azar de la siguiente manera: grupo control, grupo de tratamiento con cisplatino (7 mg/ kg), grupo de tratamiento con cisplatino (7 mg/kg) + infliximab (7 mg/kg), grupo de tratamiento con cisplatino + té blanco (WT), y grupo de tratamiento combinado Cisplatino+ WT+IFX. En el presente estudio, la exposición a Cis redujo el conteo de espermatozoides. También aumentó el estrés oxidativo testicular, así como los niveles de marcadores inflamatorios y apoptóticos. Los ensayos histopatológicos respaldaron los hallazgos bioquímicos. El tratamiento con IFX y/o WT restauró la histología testicular, preservó la espermatogénesis, suprimió el estrés oxidativo y la apoptosis, y mejoró significativamente el daño inducido por Cis. Se concluyó que el té blanco y el infliximab podrían potencialmente servir como opciones terapéuticas para la protección del tejido testicular contra los efectos nocivos de Cis.

Effect of Clomiphene Citrate on the Ultrastructure of Testis in Albino Rats

SUMMARY: The aim of the present work was to study the closer effect of clomiphene citrate on the ultrastructure of the testis of adult albino rats to provide a basis for optimizing this drug in the treatment of male infertility. The testes were removed from both groups under anesthesia and then prepared for examination by light using hematoxylin and eosin stains and a transmission electron microscope. Semithin sections were cut into 1 µm thick sections, stained with toluidine blue, and examined by light microscopy for a survey. The desired areas were placed in the center, and other areas were trimmed. Primary spermatocytes showed marked nuclear changes (pyknosis), and their nuclear membranes were ill-defined and disrupted. The cytoplasm showed widespread degeneration of mitochondria and lysosomes and focal degeneration of the rough endoplasmic reticulum compared with the control group. The spermatids were pale, and the two phases of spermatogenesis were distinctly identifiable in the control group but were confused in the treated group. Some spermatids had interrupted nuclear membranes, also containing degenerated mitochondria, focal fragmentation of rough endoplasmic reticulum, and free ribosomes. Spermatozoa in the treated group appeared deformed compared to the control, where they had deformed head caps. Leydig cells of the treated group have an irregularly shaped nucleus, with focal chromatin aggregation and peripheral chromatin condensation on the inner surface of the nuclear membrane. The observations of the present work indicate a possible causal relationship between testicular affection and ingestion of clomiphene citrate, which can be avoided by close medical observations using ultrasonography, semen analysis, or testicular biopsy to detect early malignant changes. Furthermore, the drug should not be used for more than three to six cycles and should be stopped for at least three cycles before reuse. When clomiphene citrate is ineffective in the treatment of male infertility, human menopausal gonadotropin (hMG) administration is typically selected. However, high-dose hMG therapy is associated with a variety of adverse effects. In this work, we report the success of a modified clomiphene citrate regimen in increasing sperm count without any hazards to the testicular tissue.

El objetivo del trabajo fue estudiar el efecto del citrato de clomifeno sobre la estructura de los testículos de la rata albina adulta, con la finalidad de determinar la mejor manera de utilizar este fármaco en el tratamiento de la infertilidad masculina. Los testículos se extrajeron bajo anestesia y para su análisis a través de microscopio de luz se tiñeron con HE. Además, las muestras fueron preparadas para su examen con microscopía electrónica de transmisión. Por otra parte, se cortaron secciones semifinas de 1 µm de espesor, se tiñeron con azul de toluidina y se examinaron mediante microscopía óptica. Los espermatocitos primarios mostraron cambios nucleares marcados (picnosis) y sus membranas nucleares estaban mal definidas y alteradas. En el grupo experimental las células presentaban el citoplasma con degeneración generalizada de las mitocondrias y de los lisosomas y una degeneración focal del retículo endoplásmico rugoso en comparación con el grupo control. Las espermátidas estaban pálidas y las dos fases de la espermatogénesis eran claramente identificables en el grupo control, pero se confundían en el grupo tratado. Algunas espermátidas tenían membranas nucleares interrumpidas, y también contenían mitocondrias degeneradas, fragmentación focal del retículo endoplásmico rugoso y ribosomas libres. Los espermatozoides del grupo tratado se presentaban deformados en comparación con el control. Las células de Leydig del grupo tratado presentaban un núcleo de forma irregular, con agregación focal de cromatina y condensación de cromatina periférica en la superficie interna de la membrana nuclear. Las observaciones del presente trabajo indican una posible relación causal entre la afección testicular y la ingestión de citrato de clomifeno, que puede evitarse mediante observaciones médicas minuciosas a través de ecografía, análisis de semen o biopsia testicular para detectar cambios malignos tempranos. Además, el medicamento no debiera ser usado durante más de tres a seis ciclos y debe suspenderse durante al menos tres ciclos antes de volver a usarlo. Cuando el citrato de clomifeno es ineficaz en el tratamiento de la infertilidad masculina, normalmente se selecciona la administración de gonadotropina menopáusica humana (hMG). Sin embargo, la terapia con hMG en dosis altas se asocia con una variedad de efectos adversos. En este trabajo, informamos el éxito de un régimen modificado con citrato de clomifeno para aumentar el recuento de espermatozoides sin riesgo para el tejido testicular.

Cyperus esculentus L. protects testis and sperm morphology of hyperglycaemic rats / Cyperus esculentus L. protege la morfología de los testículos y los espermatozoides de ratas hiperglicémicas

Cyperus esculentus L. (tiger nut) is a tuberous plant that promotes and protects reproductive functions, which are usually hampered in diabetics. The present study investigated the effect of Cyperus esculentus tuber extract (CETE) on testicular histology and sperm viability of alloxan-induced hyperglycaemic Wistar rats. Twenty-five adult male Wistar rats weighing 150-200g and grouped into five (n=5): Group 1, the control, administered tap water (20mL/kg), while groups 2-5 were administered a single intraperitoneal dose (120mg/kg b.w.) of alloxan, and each further received orally tap water (20mL/kg), CETE (100mg/kg), CETE (500 mg/kg) and metformin (500 mg/kg), respectively for 21 days. The animals were sacrificed, their sperm collected for analysis, while the testes were harvested, and processed for histology. Results showed significantly increased (p<0.05) blood glucose and testosterone, and significantly decreased (p<0.05) sperm pH, motility, count, morphology and density, as well as disruptions and hypertrophy of the spermatogenic and Sertoli cells of the hyperglycaemic group. There were significant (p<0.05) blood glucose decline, while the sperm parameters and testicular weight improved with normal testicular histology in the 100 mg/kg CETE, 500 mg/kg CETE, and metformin-treated groups compared to the control and hyperglycaemic group. Treatment with CETE showed blood glucose amelioration and improved sperm quality, as well as testicular damage attenuation.

Cyperus esculentus L. es una planta tuberosa que promueve y protege las funciones reproductivas, que generalmente se ven afectadas en los diabéticos. El presente estudio investigó el efecto del extracto de tubérculo de Cyperus esculentus (CETE) sobre la histología testicular y la viabilidad de los espermatozoides de ratas wistar con hiperglicemia inducida por alloxan. Veinticinco ratas Wistar macho adultas que pesaban 150-200 g y se agruparon en cinco (n = 5): el grupo 1, el control, administró agua del grifo (20ml / kg), mientras que los grupos 2-5 se les administró una dosis intraperitoneal única (120 mg / kg p.v.) de alloxan, y agua del grifo por vía oral (20ml/kg), CETE (100 mg/kg), CETE (500 mg/kg) y metformina (500 mg/kg), respectivamente durante 21 días. Los animales fueron sacrificados, su esperma recolectada para su análisis, mientras que los testículos fueron retirados y procesados para histología. Los resultados mostraron un aumento significativo (p<0,05) de la glucosa en sangre y la testosterona, y una disminución significativa (p<0,05) del pH, la motilidad, el recuento, la morfología y la densidad de los espermatozoides, así como interrupciones e hipertrofia de las células espermatogénicas y sertoli del grupo hiperglucémico. Hubo una disminución significativa (p<0,05) de la glucosa en sangre, mientras que los parámetros espermáticos y el peso testicular mejoraron con la histología testicular normal en los grupos de 100 mg / kg de CETE, 500 mg / kg de CETE y tratados con metformina en comparación con el grupo de control e hiperglucémico. El tratamiento con CETE mostró una mejora de la glucosa en sangre y una mejora de la calidad de los espermatozoides, así como atenuación del daño testicular.

Tratamiento hormonal de la pedofilia: ¿puede curar la pedofilia con la castración química? / Pedophilia hormonal therapy: can pedophilia be cured with chemical castration

Históricamente la sociedad ha rechazado el abuso sexual de menores de 13 años, dictándose leyes al respecto. La justicia luego de un debido proceso condenaba al victimario con reclusión incluso hasta la década del 70-80, con orquiectomía. Los adelantos en neurobiología, endocrinología, sicofarmacología y sicología se consideraron las bases para tratar al pedófilo y someterlo a libertad condicional, ahorrándose el costo financiero de la reclusión de por vida. Diversos países dictaron leyes contra la conducta pedófila. En dicha legislación ejerció gran influencia la promulgación en EE.UU. (estado de Washington "sobre el ofensor sexual" y el dictamen de la Corte Suprema en 1997 en el juicio de Kansas vs Hendricks). En Chile en los 90 el caso del pedófilo apodado "Zacarach" sacó a la luz pública el tema que no se quería ver. En esa fecha se presentó al parlamento un proyecto de Ley para "curar" la pedofilia con acetato de Medroxiprogesterona imitando legislación de EE.UU. Causó sorpresa en el medio endocrinológico que se usara terapia hormonal como "cura" de la pedofilia. Se ha utilizado en varios países la castración química producida por gestágenos o agonístas del GnRH más antiandrógenos (acetato de Ciproterona), para inhibir la secreción y acción de la testosterona disminuyendo líbido y erección. No se ha demostrado que exista curación de la orientación pedófila y existen dudas de la prevención primaria y secundaria de la pedofilia. Pese al adelanto tecnológico en neurociencias para estudio de las zonas vinculadas a la sexualidad, aún no existen marcadores que permitan diagnosticar o pronosticar futuros resultados de la terapia. El tratamiento médico de la pedofilia no garantiza curación ni prevención del delito pedofílico.

Historically, society has rejected sexual abuse of children under 13, with there having been laws enacted in this regard. The judicial system, after a due process, condemned the perpetrator with reclusion and even up until the decades of the 70s and 80s with orchiectomy. Advances in neurobiology, endocrinology, psychopharmacology and psychology were considered the basis for treating the pedophile and putting them on probation, saving the financial cost of imprisonment for life. Multiple countries have enacted laws against pedophilic behaviour. Such legislation was greatly influenced by the enactment in the USA (state of Washington "on the sex offender" and the ruling of the Supreme Court in 1997 in the trial of Kansas against Hendricks). In Chile in the 90s, the case of a pedophile nicknamed "Zacarach" brought to light an issue that nobody wanted to see. Around that time, a bill was presented to Parliament to try and "cure" pedophilia with Medroxyprogesterone acetate, imitating US legislation. It was a surprise in the endocrinological world that hormonal therapy would be used as a "cure" for pedophilia. Chemical castration produced by gestagens or GnRH agonists plus antiandrogens (Cyproterone acetate) has been used in several countries to inhibit the secretion and action of testosterone, reducing libido and erection. It has not been proven that there is a cure for pedophile orientation and there are doubts about the primary and secondary prevention of pedophilia. Despite technological advances in neurosciences for the study of the zones pertaining to sexuality, there are still no indicators that allow for diagnosis or prediction of future results of therapy. The medical treatment of pedophilia does not guarantee cure or prevention of pedophilic crime.

Effects of vitamin e on the epithelial-mesenchymal transition in testicular development exposed to valproic acid / Efectos de la vitamina e en la interacción epitelio-mesenquimático en el desarrollo testicular expuesto a ácido valproico

SUMMARY: In testicular differentiation, somatic cells must adopt a specific destiny towards sustentacular, peritubular and interstitial cells, being fundamental for the morphogenesis of seminiferous tubules, mediated by morphogens such as Desert Hedgehog (DHH), insulin-like growth factor-1 (IGF-1) and fibroblastic growth factor 2 (FGF-2). Its alteration could be related to failures in the development mechanisms, such as those caused by valproic acid (VPA), which can be reversed with vitamin E (VE). The objective of the study was to evaluate the epithelial-mesenchymal transition (EMT) in the testicular development of mice exposed to VPA and VE. 12 groups of pregnant female mice were formed that were separated by days post-coital (dpc) at 12.5 dpc, 17.5 dpc and 6 weeks postnatal, each one subdivided into 4 groups of 5 pregnant women each. Subgroups received different treatments from the beginning to the end of gestation orally: 600 mg/kg of VPA, 600 mg/kg of VPA and 200 IU of VE, 200 IU of VE and the control group 0.3 mL of 0.9% physiological solution. Immunohistochemistry was performed for the detection of DHH, IGF-1 and FGF-2. Immunolocalization of DHH was observed in all stages, with more evident significant differences in integrated optical density (IOD) and percentage of immunoreaction area at 6 weeks postnatal, being lower in the VPA group. In IGF-1, lower intensity and distribution of immunostaining was observed in the fetal and pubertal stages in the VPA groups, a similar situation with FGF-2, but only evident at 17.5 dpc, with significant differences. These results demonstrate that VPA can alter EMT between somatic cells in testicular development, with VE being an agent capable of attenuating this process.

RESUMEN: En la diferenciación testicular, es necesario que las células somáticas adopten un destino específico hacia células sustentaculares, peritubulares e intersticiales, siendo fundamental para la morfogénesis de los túbulos seminíferos, mediado por morfógenos como Desert Hedgehog (DHH), Factor de Crecimiento Fibroblástico 2 (FGF-2) y Factor de Crecimiento símil a Insulina (IGF-1). Su alteración se podría relacionar a fallas en los mecanismos de desarrollo, como los que ocasiona el ácido valproico (VPA), los cuales pueden ser revertidos con la vitamina E (VE). El objetivo de estudio fue evaluar la transición epitelio-mesenquimática (EMT) en el desarrollo testicular de ratones expuestos a VPA y VE. Se conformaron 12 grupos de ratones hembra gestantes que se separaron por días post-coital (dpc) a los 12.5 dpc, 17.5 dpc y 6 semanas post-natal, cada uno subdividido en 4 grupos de 5 gestantes cada uno. Cada subgrupo recibió diferentes tratamientos desde el inicio hasta el término de la gestación vía oral: 600 mg/kg de VPA, 600 mg/kg de VPA y 200 UI de VE, 200 UI de VE y el grupo control 0,3 mL de solución fisiológica 0,9%. Se realizó técnica inmunohistoquímica para la detección de DHH, IGF-1 y FGF-2. Se observó la inmunolocalización de DHH en todos los estadios, con diferencias significativas más evidentes en la densidad óptica integrada (IOD) y porcentaje de área de inmunoreacción a las 6 semanas post-natal, siendo menor en el grupo VPA. En IGF-1, se observó en la etapa fetal y puberal menor intensidad y distribución de la marcación en los grupos VPA, situación similar con la inmunomarcación de FGF-2, pero sólo evidenciándose a los 17.5 dpc, con diferencias significativas. Estos resultados demuestran que el VPA puede alterar la EMT entre las células somáticas en el desarrollo testicular, siendo la VE un agente capaz de atenuar este proceso.

Quercetin Inhibits ROS-p53-Bax-caspase-3 axis of apoptosis and augments gonadotropin and testicular hormones in chronic unpredictable stress-Induced testis injury / La quercetina inhibe el eje de apoptosis ROS-p53-Bax-caspasa-3 y aumenta la gonadotropina y las hormonas testiculares en la lesión testicular inducida por estrés crónico e impredecible

SUMMARY: A large body of evidence supports the protective role of the flavonol antioxidant compound quercetin in mammals. We tested the hypothesis that quercetin can protect against the hypothalamus-pituitary-gonadal (HPG) axis defect like a reduction in gonadotropins and testicular hormones and abnormal semen analysis induced by chronic unpredictable stress (CUS), possibly via the downregulation of oxidative stress (ROS) and p53-Bax-caspase-3 pathways. Rats were either exposed to a variety of unpredictable stressors daily before being sacrificed after 3 weeks (model group) or were treated with quercetin (50 mg/kg body weight/day) at the same time the CUS were induced (treated group). Harvested testicular tissues were stained with basic histological staining, and testis homogenates were assayed for the tumor suppressor p53, apoptosis regulator Bax, B-cell lymphoma 2 (Bcl-2), caspase-3, malondialdehyde (MDA), glutathione peroxidase (GPx), and superoxide dismutase (SOD). In addition, harvested epididymis tissues were used to assess semen analysis, and blood samples were assayed for the testicular hormone testosterone, the adrenal cortex hormone corticosterone, and the anterior pituitary gonadotropins, follicular stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH). CUS induced profound testicular damage and significantly (p<0.05) induced p53, Bax, caspase-3, MDA, and corticosterone, which were significantly (p<0.05) inhibited by quercetin except corticosterone. Whereas, quercetin significantly (p<0.05) increased FSH, LH, testosterone, Bcl-2, GPx, and SOD levels that were inhibited by CUS. In addition, CUS induced oligozoospermia, asthenozoospermia, and teratozoospermia, which were significantly (p<0.05) protected by quercetin. Thus, Quercetin protects against CUS-induced HPG defects in rats, which is associated with the inhibition of ROS-p53-Bax-caspase-3 axis.

RESUMEN: El papel protector del compuesto antioxidante flavonol quercetina en los mamíferos ha sido ampliamente reportado. Probamos la hipótesis que la quercetina puede proteger contra el defecto del eje hipotálamo-hipofisiario- gonadal (HHG) como una reducción de gonadotropinas y hormonas testiculares y análisis de semen anormal inducido por estrés crónico impredecible (ECI), posiblemente a través de la regulación reducida del estrés oxidativo (REO) y las vías p53- Bax-caspasa-3. Las ratas fueron expuestas a una variedad de fac- tores estresantes impredecibles diariamente antes de ser sacrificadas después de 3 semanas (grupo modelo) o fueron tratadas con quercetina (50 mg / kg de peso corporal / día) al mismo tiempo que se indujo la ECI (grupo tratado). Los tejidos testiculares fueron teñidos con tinción histológica básica y los homogeneizados de testículo se analizaron para determinar el supresor de tumores p53, el regulador de apoptosis Bax, el linfoma de células B 2 (Bcl-2), la caspasa-3, el malondialdehído (MDA), la glutatión peroxidasa (GPx) y superóxido dismutasa (SOD). Además, se utilizaron tejidos del epidídimo recolectados para evaluar el análisis de semen y se analizaron muestras de sangre para determinar la hormona testicular testosterona, la hormona corticosterona de la corteza suprarrenal y las gonadotropinas de la hipófisis anterior, la hormona estimulante folicular (FSH) y la hormona luteinizante (LH). El ECI indujo daño testicular importante e indujo significativamente niveles de (p <0,05) p53, Bax, caspasa-3, MDA y corticosterona, que fueron inhibidos (p <0,05) por la quercetina. La quercetina aumentó significativamente (p <0,05) los niveles de FSH, LH, testosterona, Bcl-2, GPx y SOD que fueron inhibidos por ECI. Además, ECI indujo oligozoospermia, astenozoospermia y teratozoospermia, protegidos de manera significativa (p <0,05) por la quercetina. Por lo tanto, la quercetina protege contra los defectos de HHG inducidos por ECI en ratas, lo que está asociado con la inhibición del eje ROS-p53-Bax-caspasa-3.

The morphology of paca (Cuniculus paca) testis with high dose of letrozole an aromatase inhibitor / La morfología del testículo de paca (Cuniculus paca) con altas dosis de letrozol, un inhibidor de la aromatasa

SUMMARY: The study reported the influence of the high and acute dose of Letrozole on the testis morphology in paca (Cuniculus paca), an aromatase inhibitor that reduces the endogenous estrogen, the essential hormone for spermatogenesis. Morphological changes were observed in seminiferous epithelium with germ cells with apoptotic characteristics and presence of vacuoles and nuclei in pycnose.

RESUMEN: El objetivo de este estudio fue analizar la influencia de una dosis alta de Letrozol en la morfología de los testículos de la paca (Cuniculus paca), un inhibidor de la aromatasa que reduce el estrógeno endógeno, la hormona esencial para la espermatogénesis. Se observaron cambios morfológicos en el epitelio seminífero con células germinales con características apoptóticas y la presencia de vacuolas y núcleos en picnosis.

Antioxidant activity of selenium on bisphenol-induced apoptosis and testicular toxicity of Albino rats / Actividad antioxidante el selenio sobre la apoptosis inducid por bisfenol y toxicidad testicular en ratas albinas

SUMMARY: Bisphenol A (BPA) is an industrial chemical widely used to make polycarbonate plastics for packaging and epoxy resins. This study sought to examine how selenium (Se) affects BPA toxicity in terms of albino rats' histological structure, antioxidant enzymes and reproductive organs (seminiferous tubules). Twenty-four adult male rats were divided into four experimental groups: Group 1: Control; Group 2: Orally administered BPA; Group 3: Orally administered sodium selenite; Group 4: Treated daily with BPA followed by selenium (Se). All experiment done for 4 weeks. BPA exposure caused changes in the testicular histological structure, which consists apoptosis, and led to changes in several biochemical markers: Malondialdehyde, catalase, superoxide dismutase, and glutathione peroxidase. However, these BPA side effects may be ameliorated in rats treated with BPA-plus-Se. These protective effects of Se may attributable to its ability to remove potentially damaging oxidizing agents in living organisms. The results may confirm that Se countered the oxidant effects and increased the BPA-induced stress response in rats. So, Se promotes the healthy growth and development of mammals by protecting them from oxidative stress. As human are greatly exposed to BPA and it can accumulate in tissues, there is concern about human reproductive functions particularly for occupational workers exposed usually to greater levels of BPA. Thus, the use of BPA in multiple industries must be restricted and the inaccurate usage of plastic containers should be avoided to decrease the health hazards. Administration of Se may protect against the adverse effects of BPA on reproductive functions and structures.

RESUMEN: El bisfenol A (BPA) es un químico industrial ampliamente utilizado para fabricar plásticos de policarbonato para envases y resinas epoxi. Este estudio examinó el efecto de selenio (Se) en la toxicidad del BPA en términos de la estructura histológica, enzimas antioxidantes y los órganos reproductivos (túbulos seminíferos) de ratas albinas. Se dividieron veinticuatro ratas macho adultas en cuatro grupos experimentales: Grupo 1: control; Grupo 2: BPA administrado por vía oral; Grupo 3: BPA administrado por vía oral para; Grupo 4: tratado diariamente con BPA seguido de selenio (Se). El experimento se realizó durante cuatro semanas y se observó que la exposición al BPA provocó cambios en la estructura histológica testicular, incluyendo apoptosis, y alteraciones en varios marcadores bioquímicos:malondialdehído, catalasa, superóxido dismutasa y glutatión peroxidasa. Sin embargo, estos efectos secundarios del BPA pueden mejorar en ratas tratadas con BPA-plus-Se. Estos efectos protectores del Se pueden ser atribuidos a la capacidad de eliminar agentes oxidantes potencialmente dañinos en organismos vivos. Los resultados indicaron que se contrarrestaron los efectos oxidantes y aumentó la respuesta al estrés inducido por BPA en ratas, y favorece el crecimiento y desarrollo en los mamíferos al protegerlos del estrés oxidativo. Debido a la exposición al BPA en el ser humano, se puede acumular en los tejidos, por lo que existe una preocupación por el daño a las funciones reproductivas en particular de los trabajadores que generalmente están expuestos a niveles más altos de BPA. Por lo tanto, se debe restringir el uso de BPA en las industrias y evitar el uso incorrecto de envases de plástico para así disminuir los riesgos para la salud. La administración correcta de Se puede proteger contra los efectos adversos del BPA en las funciones y estructuras reproductivas.

Effects of Corchorus olitorius and protacatechuic acid on diabetic rat testis tissue / Efectos de Corchorus olitorius y ácido protocatéquico en el tejido testicular de rata diabética

SUMMARY: The aim of this study is to investigate the effects of Protocatechuic acid and Corchorus olitorius on streptozotocin (STZ) induced diabetic rat testis tissue. Randomly selected Wistar Albino rats were divided into five groups as; Diabetes Mellitus, Diabetes Mellitus treated with Corchorus Olitorus (STZ+CO), Diabetes Mellitus treated with Protacatechuic acid (STZ+PCA), Corchorus olitorius (CO), Protocatechuic acid (PCA) and Control. Diabetic model was generated by intraperitoneal injection of 60 mg/kg Streptozotosin. After 48 hours of the STZ injection, blood samples were collected from tail vein in order to measure blood glycose levels. Over 250 mg/dL accepted as diabetic subjets and fed with 250 mg/kg Corchorus olitorius or 20 mg/kg PCA by oral gavage for three weeks. At the end of the experiment, right testes were removed and fixed in 10 % neutral formaldehyde for paraffine embedding. Sections were stained by HE, Masson trichrome, PAS and TUNEL for microscopic evaluation. Control, PCA-only and Corchorus olitorius-only treated group testes tissues showed a normal tissue organization, when degeneration in seminiferous tubules, the vacuolization, seperations in spermatogenic cell series, outpouring of cell groups in the lumen, vesicular body formation, liquid accumulation in the interstitial region and edema were observed in STZ induced diabetic models and untreated groups. Besides, higher amount of TUNEL (+) stained cells were determined in STZ group. On the other hand, blood glucose level and number of TUNEL (+) stained cells were decreased as a result of PCA and Corchorus olitorius treatment. Because of the reduction of blood glucose level and apoptotic cell numbers, PCA and Corchorus olitorius decreace the complications of diabetes mellitus induced rat testis.

RESUMEN: El objetivo de este estudio fue investigar los efectos del ácido protocatéquico y Corchorus olitorius sobre el tejido testicular de rata diabética inducida por estreptozotocina (STZ). Las ratas Wistar Albino fueron seleccionadas al azar y se dividieron en cinco grupos; Diabetes Mellitus, Diabetes Mellitus tratada con Corchorus olitorius (STZ + CO), Diabetes Mellitus tratada con ácido protocatéquico (STZ + PCA), Corchorus olitorius (CO), ácido protocatéquico (PCA) y Control. El modelo diabético se generó por inyección intraperitoneal de 60 mg/kg de estreptozotosina. Después de 48 horas de la inyección de STZ, se recogieron muestras de sangre de la vena de la cola para medir los niveles de glucosa. Niveles mayores a 250 mg/dL fueron considerados como especímenes diabéticos y alimentados con Corchorus olitorius de 250 mg/kg o PCA de 20 mg/kg por sonda oral durante tres semanas. Al final del experimento, se extirparon los testículos derechos y se fijaron en formaldehído neutro al 10 % para la inclusión en parafina. Las secciones se tiñeron con HE, tricromo de Masson, PAS y TUNEL para evaluación microscópica. Los tejidos de los testículos de los grupos control, tratados solo con PCA y con Corchorus olitorius mostraron una organización tisular normal. En cambio en modelos diabéticos inducidos por STZ y grupos no tratados se observó degeneración en los túbulos seminíferos, vacuolización, separaciones en series de células espermatogénicas, efusión de grupos celulares en la luz, formación del cuerpo vesicular, acumulación de líquido en la región intersticial y edema. Además, se determinó una mayor cantidad de células teñidas con TUNEL (+) en el grupo STZ. Por otro lado, el nivel de glucosa en sangre y el número de células teñidas con TUNEL (+) disminuyeron como resultado del tratamiento con PCA y Corchorus olitorius. Debido a la reducción del nivel de glucosa en sangre y el número de células apoptóticas, se observó que PCA y Corchorus olitorius disminuyen las complicaciones de los testículos de rata inducidos por diabetes mellitus.

Effects of melatonin against thioacetamide-induced testicular toxicity in rats / Efectos de la melatonina contra la toxicidad testicular inducida por tioacetamida en ratas

SUMMARY: This study aimed to investigate the changes in testis tissue of thioacetamide-induced rats and the effect of melatonin on these changes. Thirty-five male Wistar Albino rats were divided into five groups. Group I; Control (n=7), Group II; Melatonin (Mel) (10 mg/kg) a single dose (i.p)(n=7), Group III; Thioacetamide (TAA) (300 mg/kg) (i.p) 2 times with 24 hour intervals (n=7), Group IV; TAA (300 mg/kg) was administered at 24-hour intervals, afterwards of 10 mg/kg single dose of Mel (n=7), Group V; Mel was administered 10 mg/kg a single dose 24 hours before the administration of TAA (n=7). Testis was evaluated histologically, immunohistochemically (Heat Shock Proteins (HSP) 70 and 90), blood serum testosterone, total antioxidant status(TAS) and total oxidant status(TOS) in tissue. The tissue sections of Group III decreased seminiferous tubule diameters, and germinal epithelium spills were observed. HSP70 and HSP90 expressions were increased. There wasn't a statistically significant change in testosterone levels among the groups. While TAS levels decreased in Group III compared to control, TOS levels didn't change. HSP70 and HSP90 decreased in groups with Mel-treated. Mel was found to have both protective and therapeutic effects. According to our results, the therapeutic effect of Mel in thioacetamide-induced acute testicular injury is greater than its protective effect.

RESUMEN: Este estudio tuvo como objetivo investigar los cambios en el tejido testicular de ratas inducidas por tioacetamida y el efecto de la melatonina en estos cambios. Treinta y cinco ratas macho Wistar Albino se dividieron en cinco grupos. Grupo I; Control (n = 7), Grupo II; Melatonina (Mel) (10 mg / kg) una dosis única (i.p) (n = 7), Grupo III; Tioacetamida (TAA) (300 mg / kg) (i.p) 2 veces con intervalos de 24 horas (n = 7), Grupo IV; TAA (300 mg / kg) se administró a intervalos de 24 horas, luego de una dosis única de 10 mg / kg de Mel (n = 7), Grupo V; Mel recibió 10 mg / kg de una dosis única 24 horas antes de la administración de TAA (n = 7). Los testículos se evaluaron histológicamente, inmunohistoquímicamente (proteínas de choque térmico (PCT) 70 y 90), testosterona en suero sanguíneo, estado antioxidante total (EAT) y estado oxidante total (EOT) en el tejido. En secciones de tejido del Grupo III se observó disminución de los diámetros de los túbulos seminíferos y derrames en el epitelio germinal. Se aumentaron las expresiones HSP70 y HSP90. No hubo un cambio estadísticamente significativo en los niveles de testosterona entre los grupos. Mientras que los niveles de EAT disminuyeron en el Grupo III en comparación con el control, los niveles de EOT no cambiaron. HSP70 y HSP90 disminuyeron en los grupos tratados con Mel. Se descubrió que Mel tenía efectos protectores y terapéuticos. Según nuestros resultados, el efecto terapéutico de Mel en la lesión testicular aguda inducida por tioacetamida es mayor que su efecto protector.

Immunohistochemical identification of GM-CSF in testis of rats with oligozoospermia with the intervention of Cuscuta chinensis flavonoids / Identificación inmunohistoquímica de GM-CSF en testículos de ratas con oligozoospermia con la intervención de flavonoides de Cuscuta chinensis

Oligozoospermia is a common infertility disease, and the incidence rate is increasing year by year. Cuscuta chinensis is a commonly used medicine for the treatment of oligozoospermia in Chinese medicine. Flavonoids are its main component. GM-CSF is a multifunctional cytokine that plays an important role in the inflammatory response. In this paper, we performed HE staining and immunohistochemical staining on the testis of rats with oligozoospermia. We intend to study the expression changes of GM-CSF in rats with oligospermia and the effect of flavonoids on the expression of GM-CSF in testis of rats with oligozoospermia.

La oligozoospermia es una enfermedad común de infertilidad, con una tasa de incidencia que aumenta año tras año. Cuscuta chinensis es un medicamento de uso común para el tratamiento de la oligozoospermia en la medicina china. Los flavonoides son su componente principal. GM-CSF es una citocina multifuncional que tiene un rol importante en la respuesta inflamatoria. En este trabajo, realizamos tinción con hematoxilina y eosina y tinción inmunohistoquímica en testículos de ratas con oligozoospermia. TNuestro objetivo fue estudiar los cambios de expresión de GM-CSF en ratas con oligozoospermia y el efecto de los flavonoides en la expresión de GM-CSF en testículos de ratas con oligozoospermia.

Protective effect of gum arabic/insulin against histological changes in testes of diabetic rats / Efecto protector de la goma arábiga / insulina contra los cambios histológicos en los testículos de ratas diabéticas

Diabetes mellitus is a serious disease with a high incidence of occurrence in our community. Gum Arabic (GA) is a branched-chain polysaccharide which has strong antioxidant properties, and has been used to reduce the experimental toxicity. Yet, the effects of GA on testicular tissue in type I diabetic rats have not been enough investigated. This study was designed to investigate histological changes in testes of male Wistar rats and investigate the protective potential of GA against diabetes- induced testicular toxicity in rats. Fifty adult male Wistar rats were assigned into five groups (n = 10 of each): Group 1 (non-diabetic rats) served as control, Group 2 served as diabetic group injected with Alloxan, Group 3 diabetic group plus insulin, Group 4 diabetic group given 15 % GA in drinking water and Group 5 diabetic group plus insulin and GA for 4 weeks. Compared to control group, histopathological examinations of testicular tissue from the diabetic rats group, showed degeneration, necrosis and atrophy of seminiferous with presence of giant cells. Necrosis and hemorrhage in the renal tissue. On the other hand, treatment with GA ameliorated all the previous histological changes. Overall, oral administration of GA alone or with insulin daily for 4 weeks successfully ameliorated the testicular histological changes. These data demonstrated that GA significantly improved diabetes complication in rat testis. This study suggested that GA might have a protective effect against oxidative stress-induced impaired testicular functions in diabetic rats. The possible mechanisms of this action might be ascribed to their antioxidant and anti-inflammatory properties.

La diabetes mellitus es una enfermedad grave con una alta incidencia en nuestra comunidad. La goma arábiga (GA) es un polisacárido con propiedades antioxidantes importantes, y se ha utilizado para reducir la toxicidad experimental. Sin embargo, los efectos de GA sobre el tejido testicular en ratas diabéticas tipo I no se ha investigado lo suficiente. El estudio fue diseñado para pesquisar los cambios histológicos en los testículos de ratas Wistar macho e investigar el potencial protector de GA contra la toxicidad testicular inducida por la diabetes en ratas. Fueron asignadas cincuenta ratas Wistar macho adultas en cinco grupos (n = 10 de cada una): el grupo 1 (ratas no diabéticas) sirvió como control, el grupo 2 sirvió como grupo diabético inyectado con Alloxan, grupo diabético del grupo 3 más insulina. El grupo 4 diabético recibió 15 % de GA en agua potable, y el grupo diabético 5 más insulina y GA durante 4 semanas. Al comparar con el grupo control, los exámenes histopatológicos del tejido testicular del grupo de ratas diabéticas mostraron degeneración, necrosis y atrofia de los túbulos seminíferos con presencia de células gigantes, necrosis y hemorragia en el tejido renal. Por otra parte, el tratamiento con GA mejoró todos los cambios histológicos previos. En general, la administración oral de GA solamente, o con insulina diariamente durante 4 semanas mejoró los cambios histológicos testiculares. Estos datos demostraron que GA mejoró significativamente los efectos de la diabetes en testículos de rata. Este estudio sugiere que GA podría tener un efecto protector contra las funciones testiculares deterioradas, inducidas por el estrés oxidativo en ratas diabéticas. Los posibles mecanismos de esta acción podrían atribuirse a sus propiedades antioxidantes y antiinflamatorias.

The protective effect of Ganoderma lucidum on testicular torsion/detorsion-induced ischemia-reperfusion (I/R) injury

Abstract Purpose To investigate the protective effect of Ganoderma lucidum on testicular torsion/detorsion (T/D)-induced ischemia-reperfusion (I/R) injury. Methods Thirty male Wistar albino rats were randomly categorized into 3 groups: Group 1: sham, Group 2 ( T/D): 2,5 hours of ischemia and 7 days of reperfusion, Group 3 (T/D+ G. lucidum ): 2,5 hours of ischemia and 7 days of reperfusion and 7 days of 20 mg/kg via gastric gavage G. lucidum polysaccharides per day. Biochemical assays of Malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), Catalase (CAT), Glutathione (GSH) levels , histopathology and expression levels of VEGF and Bcl-2 with immunohistochemical methods were examined in testicular tissue. Results G. lucidum treatment was found to have prevented the T/D-induced I/R injury by decreasing MDA levels of the testis. SOD, CAT and GSH activities were decreased in group 2, while they were increased in group 3 (p<0.001) and significant improvement in the tube diameter was observed in group 3. Bcl-2-positive germinal cells were lowered in group 3 compared to the group 2. VEGF expression showed an increase in group 2, whereas it decreased in group 3. Conclusion The antioxidant G. lucidum is thought to induce angiogenesis by reducing the apoptotic effect in testicular torsion-detorsion.

Remote ischemic conditioning protects against testicular ischemia∕reperfusion injury in rats

Abstract Purpose To evaluate the effect of remote ischemic conditioning associated to N-acetylcysteine (NAC) on testicular ischemia∕reperfusion (I∕R) injury in rats. Methods Twenty-five adult male Wistar rats were randomly distributed into five experimental groups (n=5), as follows: Sham, I∕R, Perconditioning (PER), NAC and PER+NAC. Two-hour ischemia was induced by rotating the left testis 720° to clockwise direction, followed by 4 hours of reperfusion. Perconditioning was performed by three I/R cycles of 10 min each on the left limb, 30 min before reperfusion. N-acetylcysteine (150 mg∕kg) was administered 30 min before reperfusion. Results Statistical differences were observed in MDA levels between I/R group with all groups (p<0.01), in addition there was statistical difference between PER and Sham, and PER+ NAC groups (p<0.05) in plasma. Conclusions The protective effect of perconditioning isolated in the reduction of lipid peroxidation related to oxidative stress was demonstrated. However, when Perconditioning was associated with NAC, there was no protective effect against testicular injury of ischemia and reperfusion.

Effects of ketoprofen in spermatogenesis of mice exposed to continuos hypobaric hypoxia / Efecto del ketoprofeno en la espermatogénesis de ratones expuestos a hipoxia hipobárica continua

Hypoxia hypobaric (HH) can cause alterations at testicular level, with temperature increase, intrascrotal alteration and deterioration of spermatogenesis. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) such as ketoprofen have anti-angiogenic properties, and can decrease testicular abnormalities. The objective of the study was to evaluate the effect of ketoprofen on spermatogenesis of mice exposed to continuous hypobaric hypoxia. 78 Mus musculus CF-1 male mice 3 to 4 months old were used and subjected to HH in chamber at 4200 m. They were divided into 13 groups (G) of 6 animals: 10 with HH cycles (1, 2, 3, 4 and 8, lasting 8.3 days each cycle, two groups each) and 3 in normoxia (Nx). Intraperitoneal ketoprofen 25 mg/kg was administered every 4 days. Euthanasia of these animals was performed at the end of each cycle and in the case the Nx groups at the end of cycles 1, 4 and 8. Percentage of microhematocrit and reticulocytes were measured in blood smears and a morphometric and histopathological analysis of the height of the epithelium, the tubular diameter and the diameter of the tubular lumen was made. It was shown that hematocrit increases continuously up to 8 cycles, while reticulocytes increase up to 3 cycles. Continuous HH decreases the tubular diameter in a sustained manner and proportional to HH cycles, and the height increased only in the groups subjected to 8 cycles. The groups treated with ketoprofen saw a decrease in angiogenesis, presenting some degree of protection at the testicular level.

La hipoxia hipobárica (HH) puede provocar alteraciones a nivel testicular, con aumento de la temperatura, alteración intraescrotal y deterioro de la espermatogénesis. Los antiinflamatorios no esteroidales (AINEs) como el ketoprofeno tienen propiedades antiangiogénicas, pudiendo disminuir las alteraciones testiculares. El objetivo de estudio fue evaluar el efecto del ketoprofeno en la espermatogénesis de ratones expuestos a hipoxia hipobárica continua. Se utilizaron 78 ratones macho Mus musculus CF-1 de 3 a 4 meses de edad y se sometieron a HH en cámara a 4200 m. Se dividieron en 13 grupos (G) de 6 animales: 10 con ciclos de HH (1, 2, 3, 4 y 8, con duración de 8,3 días cada ciclo, dos grupos cada uno) y 3 en normoxia (Nx). Se administró ketoprofeno intraperitoneal 25 mg/kg cada 4 días. La eutanasia de estos animales se realizó al final de cada ciclo y en el caso los grupos Nx al final de los ciclos 1, 4 y 8. Se midió porcentaje de microhematocrito y reticulocitos en frotis de sangre y se hizo un análisis morfométrico e histopatológico de la altura del epitelio, el diámetro tubular y el diámetro de la luz tubular. Se evidenció que el hematocrito aumenta de manera continua hasta los 8 ciclos, en cambio los reticulocitos aumentan hasta los 3 ciclos. La HH continua disminuye el diámetro tubular de forma sostenida y proporcional a los ciclos de HH, y la altura aumentó sólo en los grupos sometidos a 8 ciclos. Los grupos tratados con ketoprofeno se vio una disminución de la angiogénesis, presentando algún grado de protección a nivel testicular.

Improvement of fertility parameters with tribulus terrestris and anacyclus pyrethrum treatment in male rats

ABSTRACT Objective Anacyclus Pyrethrum (AP) and Tribulus Terrestris (TT) have been reported as male infertility treatment in several studies; however, in Iranian traditional medicine these two plants are prescribed simultaneously. In this study, we aimed to determine the effects of AP and TT extracts both separately and simultaneously on the male Wistar rat fertility parameters. Materials and Methods 32 male Wistar rats were divided into 4 groups: Control, TT, AP, and AT treated groups. Treatment continued for 25 days and rats were weighed daily. Their testes were dissected for histological studies. Sperm analysis including sperm count, viability and motility were performed. Serum was obtained to evaluate testosterone, LH and FSH levels. Histological studies were conducted to study Leydig, and Sertoli cells, spermatogonia and spermatid cell numbers, and to measure seminiferous diameter and epithelium thickness. Results Sperm count increased in all the treatment groups. Sperm viability and motility in AT and AP groups were elevated. TT and AT groups showed significantly increased testosterone level compared to control group (P=004, P=0.000, respectively) and TT, AP and AT treatment groups showed increased LH level (P=0.002, P=0.03 and P=0.000, respectively) compared to control, while only AT group showed increased FSH (p=0.006) compared to control. Histological studies showed significant increase of spermatogonia, Leydig and Sertoli cell numbers and epithelial thickness in AT group compared to other groups. All the treatment groups had higher number of Leydig, spermatogonia and spermatid cells. Conclusion TT and AP improved sexual parameters; however, their simultaneous administration had higher improving effects on studied parameters.

Antioxidant action of alpha lipoic acid on the testis and epididymis of diabetic rats: morphological, sperm and immunohistochemical evaluation

ABSTRACT Introduction Chronic hyperglycemia is caused by diabetes mellitus-committed genital morphophysiology, and oxidative stress is one of the main factors involved in this process. Alpha lipoic acid (ALA) can prevent metabolic and morphological changes in diabetic individuals. Objectives In present study, we evaluated the effects of regular ALA consumption on the spermatogenesis and histoarchitecture in the male genital system of diabetic rats. Materials and Methods Thirty-two Wistar rats were divided into groups: Control (CG); Diabetic Control (DCG), receiving commercial diet: ALA Group (ALAG) and Diabetic ALA Group (DALAG), fed diets with added ALA (300 mg/Kg bw). The diabetic groups received a single injection of streptozotocin (60 mg/kg). After sixty days of the diet, the animals were euthanized, and semen, testis and epididymis samples were collected. A histomorphometric analysis was performed to determine the epithelial height, tubular and luminal diameter, tubular and luminal area of seminiferous tubules and each epididymal region. Sertoli cells were evidenced using the antivimenti antibody and were quantified. The results were statistically analyzed by the ANOVA test. Results At the end of the experiment, the DALAG glycemia was significantly lower than DCG. The histomorphometric parameters of the seminiferous and epididymal tubules did not show improvement in the DALAG. However, there was an improvement in the DALAG in terms of the concentration, motility and percentage of spermatic pathologies, as well as in the number of Sertoli cells (p<0.001). Conclusions The results demonstrated that supplementation with the ALA antioxidant retards testicular lesions and preserve the process of spermatogenesis in diabetes.

Improved histoarchitectural changes with angiotensin receptor blockers in early testicular and cauda toxicity in rats / Mejora de los cambios en la histoarquitectura con bloqueadores de receptores de angiotensina en la toxicidad precoz testicular y de cauda en ratas

SUMMARY: Reproductive dysfunction is a complication for many diseases and toxins. Its early diagnosis and treatment are immensely important. Here the morphological histoarchitecture changes in early testicular and cauda toxicity before and after treatment with angiotensin receptor blockers were evaluated. Low-grade testicular damage was induced using thioacetamide (TAA, 50 mg/kg/day) intraperitoneally for two weeks in rats. The rats were randomly divided into four groups (n = 8) treated daily orally for three weeks as follows: Normal control (distilled water), TAA (positive control), TAA+candesartan (0.2 mg/kg) and TAA+losartan (7.5 mg/kg). Serum testosterone and testicular malondialdehyde and glutathione were measured. The changes in histoarchitecture of testis and cauda epididymis were evaluated by hematoxylin and eosin for general structure, Masson's trichrome for collagen, periodic acid Schiff for basement membrane, and caspase-3 and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) for immunohistochemical analysis. The TAA-rats showed decreases of serum testosterone and testicular glutathione, increases in testicular malondialdehyde, degenerative changes and apoptosis in germ cells, thickening of tubular basal lamina and increases in expression of caspase 3, and decreases in expression of PCNA. The ARBs (candesartan and losartan) significantly reversed these changes with non-significant differences in-between. Treatment with ARBs (candesartan and losartan) significantly reversed TAA-induced low-grade testicular and cauda toxicity in rats. This could be potentially useful for early treatment of male patients with occupational toxicant-induced reproductive dysfunction especially if they are using ARBs for other comorbidities.

RESUMEN: La disfunción reproductiva es una complicación por muchas enfermedades y toxinas. Su diagnóstico y tratamiento tempranos son inmensamente importantes. Aquí se evaluaron los cambios morfológicos en la histoarquitectura en la toxicidad precoz testicular y cauda antes y después del tratamiento con bloqueadores de receptores de angiotensina. Se indujo daño testicular de bajo grado usando tioacetamida (TAA, 50 mg / kg / día) por vía intraperitoneal durante dos semanas en ratas. Las ratas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos (n = 8) tratados diariamente por vía oral durante tres semanas de la siguiente manera: control normal (agua destilada), TAA (control positivo), TAA + candesartan (0,2 mg / kg) y TAA + losartán (7,5 mg / kg). Se midieron la testosterona sérica, el malondialdehído testicular y el glutatión. Los cambios en la histoarquitectura de los testículos y la epidermis de la cauda se evaluaron mediante Hematoxilina y Eosina para determinar la estructura general, con tricrómicro de Masson para el colágeno, ácido periódico de Schiff para la membrana basal y la caspasa-3 y el antígeno nuclear de células proliferantes (PCNA) para análisis inmunohistoquímico. Las ratas TAA mostraron disminución de la testosterona sérica y glutatión testicular, aumentos en el malondialdehído testicular, cambios degenerativos y apoptosis en células germinales, engrosamiento de la lámina basal tubular y aumentos en la expresión de la caspasa 3, y disminución en la expresión de PCNA. Los ARB (candesartán y losartán) revirtieron significativamente estos cambios con diferencias no significativas en el medio. El tratamiento con BRA (candesartán y losartán) revirtió significativamente la toxicidad testicular y cauda inducida por TAA en ratas. Esto podría ser potencialmente útil para el tratamiento temprano de pacientes con disfunción reproductiva inducida por tóxicos ocupacionales, especialmente si están usando BRA para otras comorbilidades.